Hoe lees je een Certificate of Analysis (COA) voor peptiden?

Een Certificate of Analysis (COA) is het analyserapport van één specifieke productiebatch. Het laat zien welke tests zijn uitgevoerd, met welke methode en met welk resultaat. Voor onderzoekers is het COA de belangrijkste manier om te controleren of een peptide is wat het label belooft.

Wat staat er op een COA?

Een volledig COA bevat minimaal deze onderdelen:

• Productnaam en batchnummer. Het batch- of lotnummer moet overeenkomen met het nummer op de vial. Een COA zonder batchnummer zegt niets over het product dat je in handen hebt.
• Naam van het laboratorium en testdatum. Een onafhankelijk lab is sterker bewijs dan een rapport van de producent zelf.
• Zuiverheid (HPLC). Meestal uitgedrukt als percentage, bijvoorbeeld 99,1%. Dit is het aandeel van het doelpeptide in het totale UV-signaal.
• Identiteit (massaspectrometrie). De gemeten massa wordt vergeleken met de theoretische massa van het peptide.
• Uiterlijk. Bijvoorbeeld wit gelyofiliseerd poeder.

Uitgebreidere rapporten vermelden ook het netto peptidegehalte, het watergehalte (Karl Fischer), het gehalte aan tegenionen zoals TFA of acetaat, en soms endotoxine- of steriliteitstests.

Zuiverheid is niet hetzelfde als peptidegehalte

Dit is de meest gemaakte fout bij het lezen van een COA. De HPLC-zuiverheid zegt welk deel van de peptide-achtige stoffen in het monster het juiste peptide is. Het netto peptidegehalte zegt welk deel van het totale gewicht uit peptide bestaat. De rest is water en tegenionen die tijdens de synthese en zuivering achterblijven.

Een peptide kan dus een HPLC-zuiverheid van 99% hebben en tegelijk een netto peptidegehalte van 75%. Voor nauwkeurige concentratieberekeningen in een experiment is dat verschil belangrijk.

Het HPLC-chromatogram lezen

Een goed COA bevat het chromatogram zelf, niet alleen het percentage. Je ziet dan één grote piek (het doelpeptide) en eventueel kleine pieken van onzuiverheden, zoals verkorte sequenties of oxidatieproducten. Hoe groter het oppervlak van de hoofdpiek ten opzichte van de rest, hoe zuiverder het monster. Lees meer in ons artikel over HPLC en massaspectrometrie.

Vijf controlevragen

1. Komt het batchnummer op het COA overeen met de vial?
2. Is het rapport opgesteld door een onafhankelijk lab, en is dat lab te verifiëren?
3. Bevat het rapport zowel zuiverheid (HPLC) als identiteit (MS)?
4. Is het chromatogram bijgevoegd?
5. Is de testdatum recent genoeg voor de batch die je ontvangt?

Sommige laboratoria bieden een online verificatie aan, waarmee je met een code controleert of het rapport echt door hen is opgesteld. Gebruik die mogelijkheid als die er is.

COA’s bij LabPrime Peptides

Beschikbare COA’s per product en batch publiceren we op onze Lab Results-pagina. Mis je een document voor een batch, neem dan contact met ons op.

Alle producten van LabPrime Peptides zijn uitsluitend bedoeld voor laboratorium- en onderzoeksdoeleinden.